平成26年度 第99回 薬剤師国家試験問題
一般 理論問題 - 問 114

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問 114  正答率 : 58.4%

 国家試験問題

国家試験問題
乳酸脱水素酵素（lactate dehydrogenase：LDH）は、下記の反応を触媒する酵素である。

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図1は、ヒト心臓の細胞質にあるLDHのアイソザイムを用いて、さまざまなpHの溶液中で、ピルビン酸（P）からL-乳酸（L）が生成する反応（P→L）、あるいはL-乳酸からピルビン酸が生成する反応（L→P）について調べたときの酵素活性の相対値を示している。また、図2は、NAD＋とNADHの吸収スペクトルを示している。
スクリーンショット 2017-04-03 22.02.06.png

L-乳酸を基質として血清中の本酵素の活性を測定するとき、方法と考察に関する記述のうち適切でないのはどれか。１つ選べ。

１　反応液は、血清（披検試料）、L-乳酸、NAD＋及び緩衝液から成る。
２　試料である血清を加えない反応液を調製し、これについても同様に測定する。
３　活性測定に用いる緩衝液のpHは、8.5に調整する。
４　一定時間反応させた後、反応液の340 nmの吸光度の減少を測定する。
５　血清中の本酵素の活性は、心臓傷害の指標になると考えられる。

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問 114    
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 e-REC解説

解答　４

本設問に、「L-乳酸を基質として血清中の本酵素の活性を測定するとき」とあるため、下記の反応（L→P）について考える。
スクリーンショット 2017-04-03 22.03.31.png


１　適切
（L→P）について調べるため、血清（被検試料）、L-乳酸、NAD＋及び緩衝液から成る反応液を用いる。

２　適切
被検試料（血清）を含まない反応液を用いて対照実験を行い、試料以外に起因するLDH活性を補正する。

３　適切
図1より、L→P反応の最適pH（LDH活性の相対値が最大値を示すpH）は8.5であるため、活性測定に用いる緩衝液のpHは8.5に調整する。

４　不適切
（L→P）では、ピルビン酸、NADH、H＋が生じる。図２よりNADHは340 nmに吸収極大をもつため、340 nmの吸光度の増加を測定することによって酵素活性を測定する。

５　適切
心筋に存在するLDHは、心筋梗塞等の心臓傷害に際して心細胞内から血液中に漏出する。よって、血清中のLDH活性は、心臓傷害の指標となる。

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