問115
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QUESTION ▪ 第100回 薬剤師国家試験 一般理論問題
マウスのある組織から目的のタンパク質を精製し、その性質を明らかにするため、以下の2つの実験を行った。実験方法と考察に関する記述のうち、正しいのはどれか。２つ選べ。
【実験 1】 精製したタンパク質のジスルフィド結合を還元後、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)-ポリ アクリルアミドゲル電気泳動法を行った。ゲル中のタンパク質を染色すると、単一のバンドが観察され た。分子量が既知の 5 種類の標準タンパク質についても同様の操作を行い、図 1 の結果を得た。
【実験2】精製したタンパク質を用いてゲルろ過クロマトグラフィーを行った。分子量が既知の6種類 の標準タンパク質についても同様の操作を行い、図 2 の結果を得た。
【実験 1】 精製したタンパク質のジスルフィド結合を還元後、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)-ポリ アクリルアミドゲル電気泳動法を行った。ゲル中のタンパク質を染色すると、単一のバンドが観察され た。分子量が既知の 5 種類の標準タンパク質についても同様の操作を行い、図 1 の結果を得た。
【実験2】精製したタンパク質を用いてゲルろ過クロマトグラフィーを行った。分子量が既知の6種類 の標準タンパク質についても同様の操作を行い、図 2 の結果を得た。
1
【実験1】では、電気泳動の前に、精製したタンパク質試料にSDSと2-メルカプトエタノール（2-ME）を含む緩衝液を加えて加熱した。
正解
2
【実験1】のタンパク質の染色には、臭化エチジウム（ethidium bromide）を用いた。
正解
3
【実験2】では、カラムから溶出したタンパク質を検出するため、溶出液の260 nmにおける吸光度を連続的に測定した。
正解
4
【実験1】の結果より、精製したタンパク質の単量体（モノマー）の分子量は、およそ25,000 Daと考えられる。
正解
5
【実験1】及び【実験2】の結果より、精製したタンパク質は4量体（テトラマー）として存在すると考えられる。
正解
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